Bộ nhuộm Ziehl Neelsen

Nguyên tắc: Do vách tế bào của vi khuẩn Mycobacteria có lớp vỏ sáp bao bọc nên khi nhuộm với phức hợp Carbon Fuchsin sẽ không bị tẩy màu bởi dung dịch có tính tẩy mạnh (alcohol acid)
Bộ nhuộm bao gồm:
- Carbon Fuchsin 100ml: 1 chai
- Alcohol acid 100ml: 1 chai
- Methylene Blue 100ml: 1 chai
Phương pháp thực hiện thử nghiệm:
1. Làm một phết bệnh phẩm hoặc vi khuẩn trên một lame sạch. Để khô tự nhiên và cố định bằng cách hơ nóng qua ngọn lửa của đèn cồn.
2. Nhỏ vài giọt Carbon Fuchsin cho phủ đều trên bề mặt phết nhuộm. Dùng que gòn tẩm Alcohol 95% đốt nhẹ dưới lame để hơ nóng thuốc nhuộm, tránh đun sôi thuốc nhuộm. Thực hiện hơ nóng 3 lần trong 5 phút. Để lame nguội.
3. Rửa nhanh bằng nước.
4. Tẩy màu bằng cách nghiêng lam và nhỏ từ từ Alcohol acid lên phết nhuộm, khi giọt Alcohol acid rời khỏi lam sạch màu thì ngưng ngay.
5. Rửa nhanh bằng nước.
6. Nhỏ vài giọt Methylene Blue cho phủ đều trên bề mặt phết nhuộm và để yên trong vòng 1 phút.
7. Rửa nhanh bằng nước.
8. Thấm khô phết nhuộm và quan sát dưới kính hiển vi.
Biện luận kết quả:
Vi khuẩn kháng acid bắt màu hồng, các vi khuẩn khác bắt màu xanh biển nhạt.